暗视野显微镜是利用丁达尔效应的一种检测设备,当一束光线透过黑暗的房间,从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”,无物体时,视野暗黑不可能观察到任何物体,而当有物体时,以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。因此暗视野显微镜使用方法也与普通显微镜使用方式不同。
基于暗视野显微镜的原理开发的显微镜在操作时,选厚薄在1.0~1.2 mm 的干净载玻片一块,滴上酿酒酵母悬液,加盖玻片调节聚光镜光圈,直到光源的光圈孔调至最大。在聚光器上放一大滴香柏油,将标本置载物台上,旋上聚光器使油与载玻片接触(不能有气泡发生)。在将制作好的细菌悬滴标本片置于载物台上,上升聚光器至顶部使油与载玻片接触。
然后暗视野显微镜的放大光源,进行聚光器光轴调节及调焦。用10倍的物镜找到被检物像,关小聚光器虹彩光圈至可在视野中看到视场光阑的轮廓,再上下缓慢调整聚光器,这样会使视场光阑的像变得清晰,如视场光阑不在场中央,利用聚光器外侧 的两个调节钮进行调整,当亮光点调到场中央后,再将其开大,即可进行观察。
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